HPLC常見故障及排除方法:
色譜柱的維護(hù)1.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍 2.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化 3.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度) 4.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,保存大乙腈中 5.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理 液相色譜儀色譜柱使用及維護(hù) 每天用足夠的時(shí)間來平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問題方面獲得zui大的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!------ 一定得做! 新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測(cè)試,即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報(bào)告上測(cè)試條件和樣品來測(cè)定該色譜柱的柱效。并且,在以后的使用中,應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。 卡套柱的安裝(不加預(yù)柱)
1.將卡套架套入柱芯 2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夾套 3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊 5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端 6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手
注意:使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來,否則會(huì)造成填料的流失。 卡套柱的安裝(加預(yù)柱) 1.將卡套架套入柱芯 2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯 3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 4.將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi) 5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊 6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端 7.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片(同時(shí)可以修補(bǔ)色譜柱)
注意:在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前,應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗,而且修補(bǔ)工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時(shí)帶出柱子內(nèi)的填料。 1.將修補(bǔ)工具中的2套入柱芯的頂端 2.將修補(bǔ)工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,并順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)到旋緊 3.一手握柱芯,另一只手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網(wǎng) 4.用一個(gè)小鏟子輕輕地取出濾網(wǎng)下面的玻璃棉以及被污染的填料 5.將新的填料用甲醇潤(rùn)濕,然后填入挖去的部位,壓平 6.裝上新的玻璃棉濾網(wǎng),并用修補(bǔ)工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端 7.柱芯頂端套上2,然后將濾網(wǎng)放入 8.壓緊,然后取下2,再用4將濾網(wǎng)的邊緣壓平 平衡色譜柱 反相色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉,因此在用流動(dòng)相分析樣品之前,應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"。
如何平衡色譜柱? 平衡過程中,將流速緩慢地提高 用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來平衡)
|